作者：Rosa Vanyan，Nataliya Dolgushina，Andrey Donnikov，Ekaterina Subina，Natalia Usman，Maria Kuznetsova and Gennady Sukhikh

俄罗斯联邦保健省产科妇科围产医学研究中心

方法：该回顾性病例对照研究共有150名患者（作为实验组卵巢应答性低的65人，作为对照组正常卵巢的85名女性）参加。所有患者都会按照促卵泡激素和促性腺激素释放激素拮抗剂的标准用法刺激卵巢。基因的分型是通过聚合酶链反应和之后的溶解曲线的读取得到的。统计检定均为双侧检定，百分率值采用卡2试验检定，关联性采用比计算。

前文

卵巢不良反应（POR）是一个术语，表示在性腺刺激过程中生长的卵泡数量在超声波中减少（这里我们不涉及潜在的功能性问题，但它会成为另一个主题）根据欧洲人类生殖胚胎学会关于POR定义的共识（博洛尼亚标准），POR必须同时满足以下三个特征中的至少两个。（1、高龄产妇（≥40）或其他具体风险因素，卵巢刺激方案（ii）正常使用≤3卵母细胞测试和卵巢储备（3、功能异常（ort；即窦状卵泡计数少（AFC；5~7以下）或血液中抗米尔克神经元激素水平低（AMH；g；这种稀有的G等位基因在POR群中明显富集。POR群中有3例SNP的杂合样本，但在对照群中未发现SNP、PG。POR群中G等位基因的表达率上升。POR为062，对照群为046，P≈005。表

3、在POR群中，c.308G和c.328+905G合计以2.6±0.1倍的频率出现，但在其他已知的SNP中，两组之间没有显著差异。

SNP位置NCBI（38.1、位置氨基酸取代核苷酸取代等位基因的出现频率

rs41308602扩展子段150911091Asn103 Serc.308A>G0.020

rs138281369显在子段150910829 Val16 Metc.46G>A0.020

rs104894767外显子段250915966Ala180Thrc.538G>A0.013

rs104894763异常区段150910985Arg68Trpc.202C>T0.007

rs3897937内显示部分150912016c.328+905A>G0.526

rs796052131导出子段250916035Leu203Leuc.607C>T0.020

rs796052132异常区段150910775c.-8delC0.040

表2.与BMP15相关的SNP的详细参数。

以下两个是在这篇文章中新发现的SNP，其余的是在其他文献中发现的SNP。

埃克森测序实验公开了两个新的BMP15SNP，并提交给ClinVar数据库进行注册。c.607c>T（rs796052131、和c.-8一碱基缺失（rs796052132、其中，c.607c>T置换仅见于对照组，可能与卵巢的保护功能有关。相比之下，新发现的C.-8delC单碱基缺失在POR组中比较常见（表3、

SNP等位基因出现概率等位基因蚕2p值

POR（n=65、对照组（n=85、

n = rs413086020.046 （3、 04.0030.0454

rs1382813690.015 （n = 1、 0.023 （n = 2、 0.1240.7240

rs1048947670.015 （n = 1、 0.011 （n = 1、 0.0360.8481

1、 01.3160.2512 rs1048947630.015 （n =

rs38979370.615 （n = 40） 0.459 （n = 39） 3.6210.0570

n = rs79605213100.035 （3、 2.3400.1260

n = rs7960521320.061 （4、 n = 0.023 （2、 1.3850.2391

表3.新发现的变种rs796052131仅在对照组中表达，可能与卵巢的保护功能有关。

另一方面，rs796052132在POR群中出现频率变高。

本实验还对rs41308602、rs3897937、rs104894763、rs138281369、rs104894767和新发现的rs796052131进行了半峰型分析（全部映射到BMP15埃克森1或2或其附近）在POR群中，显示了这个围裙类型可能会发现27倍（表4、在卵巢刺激中，发现rs3810682/rs3897937宿主类型与卵泡数上升（≥12、相关[17]，因此我们还调查了3种常见的SNP映射到埃克森1或其附近的组合的宿主类型的概率（rs41308602，rs104894763，rs3897937、同样，POR组比对照组高（表4、

驼峰型POR（n=65、对照组（n=85、比（95%置信区间）

rs41308602;rs138281369

rs104894767;rs104894763

rs3897937;rs796052131

0.7670.5502.7 （1.25;5.96、

rs41308602;rs104894763

rs38979370.6760.4582.47 （1.20;5.14、

表4。这是POR和对照组中出现变种相关类型的概率的总和。

讨论

结果表明，POR与两个已知的BMP15变种，即埃克森SNP rs41308602（c.308A>G）和尼克森SNP rs38979307（c.328+905A>G）有关。通过c.308A>G置换，关联的蛋白质103部位从蛋白质丝氨酸变成天冬酰胺。根据文献，这个G等位基因在闭经患者和健康的女性中都能看到，但是在闭经患者中，c.308G经常与G（c.-9C>G）或T（c.852C>T）结合[18]。

c.328+905A>G与卵巢功能的关系值得商榷。Hanevik等人[19]在POR样本中发现G等位基因频率较高，Mendoza等人[20]发现G等位基因或与卵巢衰老相关的一些基因标记的女性生育期较短。moron等[17]发现卵巢刺激在呼应高的患者中（包括卵巢过度刺激综合征的患者），c.高的概率为673t，c。c>a>g和c。328 + 9059С> g的tgg围裙类型。Gonzalez等人[21]认为，AG基因型比AA基因型更可能受到排卵障碍和不孕症的保护。

与已经发表的数据所预期的相反，在本研究中，三个其他已知SNP与POR无关。例如，Di Pasquale等人，一项大的科霍特研究[22]显示卵巢的早老表型与两个BMP15变种，c.202C>T→p.arg68trp和c.538G>A→p.ar180thr有关。Ledig等人[23]认为c.538G>A不是突变而是多态性，但卵巢早老症患者和对照组都发现了该变种。但是，C.538G/A异质结的比例在早老症卵巢患者中有所增加，一些研究进一步证明[10,18]。在我们的实验中，两组都证实了这些异质结，表明G等位基因与POR无关。但是，这个实验的样本数量很少，所以需要更多的实验来验证。

仅在对照组中出现的新变种c.607T没有氨基酸的替代（对应于亮氨酸的CTA改为同义TTA）总体而言，这些密码子出现在人类基因组中的频率基本相同（每个人约7%的亮氨酸基因总数）然而，卵巢中TTA特定的tRNA比CTA特定的tRNA丰富[24]，并且c.607C>t的替代可能增加局部BMP15mRNA的翻译速度并影响蛋白生成。我们发现一种新的单碱基缺失变种c.-8delC在POR组比对照组更常见，位于BMP15mRNA位点42的5′非翻译区。这不会干扰朗读框，但可能会影响翻译的第一步。

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